Гистологическое исследование

Гистологическое исследование (ГИ) — это изучение при помощи микроскопа образцов тканей человека, полученных после биопсии или операции.

Для чего проводится гистологическое исследование?

Гистологическое исследование, в отличие от визуализационных методов, позволяет напрямую  увидеть изменения в органах и тканях организма. Без проведения гистологического исследования невозможно достоверно различить доброкачественные и злокачественные заболевания. Без гистологического подтверждения онколог не имеет права выставить диагноз «рак». Кроме того, гистологическое исследование позволяет оценить, насколько качественно и радикально проведено оперативное вмешательство, оценить факторы риска и прогноза для пациента. 

Гистологическое исследование позволяет уточнить стадию, а также степень ответа опухоли на предоперационное (неоадъювантное) лечение, если оно проводилось. Эта информация необходима лечащему врачу для выбора дальнейшей тактики лечения. 

Как проводится гистологическое исследование?

Врач-патоморфолог исследует окрашенный образец ткани, помещенный на гистологическое стекло под микроскопом. По результатам исследования он выдает заключение. 

После того как материал доставили в лабораторию, его особым образом подготавливают к исследованию. Сначала образцы тканей пациента раскладывают в специальные гистологические кассеты. Затем образец в кассете проходит последовательные этапы обработки: фиксацию, обезвоживание и пропитывание парафином. Залитый формалином образец ткани обычно называют «блок». Блок можно хранить длительное время при температуре от +10 до +25°C вне холодильника в сухом помещении, в тёмном месте (коробке, футляре).

С парафинового блока производят тонкий срез образца ткани на специальном приборе — микротоме. Толщина срезов не должна превышать 4–5 мкм, если образец будет исследоваться на обычном микроскопе. Только так клетки будет возможно рассмотреть, они не будут «наслаиваться» друг на друга.

Затем срез помещают на специальное стекло и окрашивают. Чаще всего используют окраску гематоксилином и эозином, поэтому ткань приобретает оттенки от розового до фиолетового. Окрашенный образец ткани, с двух сторон покрытый стеклами, обычно называют «гистологическое стекло». Именно его оценивает под микроскопом врач.

Врач оценивает, как выглядит ткань в целом, отдельные клетки и их структуры, а также другие параметры. Это позволяет распознать конкретную разновидность опухоли. Кроме того, на этом этапе врач может определить, является ли образование метастазом, и предположить, откуда он мог появиться.

Если же данных для постановки диагноза недостаточно или нужно подтвердить диагноз, врач назначает дополнительные окраски. Окраски могут быть традиционные (гистохимические) и иммуногистохимические (ИГХ, иммунофлюоресценции). Метод ИГХ позволяет с помощью специальных веществ (маркеров) «подсветить» нужные клетки. Также иногда для постановки диагноза может потребоваться проведение молекулярно-генетического исследования. 

Какие специалисты и где проводят гистологические исследования? 

Врач, который занимается гистологическими исследованиями, называется патологоанатом (или патоморфолог). 

Гистологические исследования проводятся в патолого-анатомических отделениях медицинских организаций или в патолого-анатомических бюро.

Гистологическое исследование при раке молочной железы

Гистологическое исследование необходимо проводить до начала лечения, даже если планируется сначала проводить операцию. Врач определяет характеристики опухоли, ставит гистологический диагноз, определяет факторы неблагоприятного прогноза (например, лимфоваскулярную инвазию). 

Кроме того с помощью иммуногистохимических исследований определяется содержание в опухоли рецепторов эстрогенов, прогестеронов, HER2 и Ki67. 

Эта информация необходима для назначения специфической терапии. Гистологическое исследование после операции дает возможность оценить края удаленного участка, наличие метастазов в лимфоузлах, пораженность кожи и других структур, а также степень ответа опухоли на предоперационное (неоадъювантное) лечение, если оно проводилось. Ответ на неоадъювантную терапию может изменить тактику лечения после операции. Более подробно можно почитать тут. 

Гистологическое исследование при раке предстательной железы

Гистологическое исследование необходимо проводить до начала лечения, так как от его результатов будет зависеть тактика дальнейшего лечения. Если результаты биопсии отрицательные (злокачественного новообразования нет), пациент отправляется «на наблюдение». При положительных результатах биопсии тактика будет зависеть от особенностей опухоли и от группы риска, к которой относится пациент. Результаты гистологического исследования также помогают предположить как будет протекать болезнь и какой будет исход. 

Гистологическое исследование также проводится с целью оценки радикальности операции, уточнения группы риска, факторов неблагоприятного прогноза, патологической стадии заболевания.

Гистологическое исследование при раке легкого

Гистологическое исследование позволяет определить, какой именно рак легкого развился у пациента, так как это обширная группа заболеваний с разным прогнозом и подходами к лечению. Мелкоклеточный и немелкоклеточный рак легкого лечат также по-разному. Кроме того, гистологическое исследование позволяет определить важные факторы прогноза, а именно стадию болезни, степень дифференцировки, лимфоваскулярную инвазию, наличие микрометастазов в лимфоузлах, лимфоцитарную инфильтрацию опухоли. 

Очень важны для подбора лечения результаты молекулярно-генетических исследований (обычно парафиновые блоки отправляют на эти исследования после проведения гистологического исследования). Кроме того, с помощью иммуногистохимических исследований можно определять статус PD-1/PD-L1, высокий уровень которого повышает вероятность хорошего ответа на иммунотерапию.

Подробнеео том, на что еще влияют результаты, тут. 

Гистологическое исследование при меланоме и раке кожи

Гистологическое исследование позволяет поставить диагноз меланомы  или другой опухоли кожи. Существуют гистологические признаки, которые свидетельствуют о более высоком риске рецидива и появления метастазов. Наличие этих признаков в гистологическом заключении может быть поводом для применения дополнительного лечения - лучевой терапии или повторной операции. 

Стоит обратить внимание на следующие признаки: 

• положительный край резекции (наличие опухолевых клеток вблизи края хирургического удаления – свидетельствуют о высокой вероятности присутствии опухолевых клеток в зоне оперативного вмешательства), 
• наличие периневральной и лимфоваскулярной инвазии (признаки возможного метастазирования), 
• толщина опухоли и инвазия по Кларку (чем толще опухоль и чем глубже она врастает в кожу, тем выше риск рецидива и метастазирования).

Подробнее тут и тут.

Сроки выполнения гистологического исследования

Сроки проведения исследования зависят от того, использовались ли дополнительные методы. Например, иногда требуются дополнительные срезы, дополнительные окраски, генетические методы. Материал, которому не нужны дополнительные манипуляции, анализируют в срок не более 4 рабочих дней. Если же для постановки диагноза нужно выполнить ИГХ с применением более 5 маркеров, срок увеличивается до 15 рабочих дней.

Выводы

• Гистологическое исследование - это единственный способ достоверно подтвердить или опровергнуть наличие у пациента онкологического заболевания. 
• Материал для гистологического исследования получают путем выполнения биопсии или после операции.
• После получения и обработки материала, врач-патоморфолог изучает его под микроскопом. Часто гистологическое исследование дополняется проведением дополнительных методов (ИГХ, МГИ). 
• Срок получения результатов гистологического исследования от 4 до 15 рабочих дней.
• По результатам гистологического исследования врач оценивает наличие факторов риска рецидива и прогрессирования рака. В соответствии с ним он определяет дальнейшую тактику лечения.

Что еще почитать?

1. Видеоматериал “Как проводится исследование?” (на русском языке).
2. Видеоматериал “Как делают гистологические препараты” (на русском языке).
3. Видеоматериал “Основы иммуногистохимии” (на русском языке).
4. Видео-лекции от БиоВитрум (на русском языке).